凍存管主要由保存液、保存管和小瓷珠三部分組成,它是一種實(shí)驗(yàn)室保存菌種的容器,用于菌種的保存或者轉(zhuǎn)移,一般菌種保存管內(nèi)有25顆小瓷珠用于細(xì)菌的吸附和保存。
使用過程中,將細(xì)菌接種在保存管內(nèi),放置于-20℃或-80℃環(huán)境中可長期保存。(-20℃可保存一年,-80℃可保存兩年)。細(xì)菌菌株的保存始終是實(shí)驗(yàn)室一個(gè)*的工作。長期以來,形成了平板傳代法、斜面?zhèn)鞔?、凍干法等多種。
保存方法:隨著可保存時(shí)間的由短到長,保存復(fù)雜程度及對(duì)相應(yīng)設(shè)備的要求也是逐步增加。如何取得可保存時(shí)間與保存復(fù)雜程度之間的關(guān)系,是菌種保存方法的關(guān)鍵。
凍存管操作步驟:
1、直接刮取平皿上生長的新鮮培養(yǎng)物置入菌種保存管中;
2、一般一個(gè)平皿的純培養(yǎng)物可保存兩個(gè)菌種保存管;
3、使用時(shí)用接種針從菌種保存管中取出一個(gè)小瓷珠直接劃線平板或置入相應(yīng)增菌液中。
滅菌與保存:
菌種保存管整體由r射線滅菌,在使用前可室溫存放。在未經(jīng)使用前,可存放1年。
注意事項(xiàng):
從原理上講,所有菌種都可用凍存管保存。菌種保存的原理是DNA復(fù)制時(shí)自發(fā)突變導(dǎo)致菌種退化,因此要?jiǎng)?chuàng)造代謝不活潑的狀態(tài),干燥、低溫、缺氧、缺營養(yǎng)的環(huán)境,創(chuàng)造的環(huán)境越接近此狀態(tài),所保存的菌種的時(shí)間就越長。
但需要注意的是,由于苛刻菌(如流感嗜血桿菌、腦膜炎萘瑟氏菌)等特殊細(xì)菌保存時(shí),需-80℃或更低溫度保存,才可以做到更長期的保存。